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Genome-wide koom haum tsom xam ntawm lub zog ntawm MAMP-elicited tiv thaiv teb thiab tsis kam mus rau lub hom phiaj nplooj ntoos nyob rau hauv sorghum

Cov khoom cog thiab cov kab mob

Lub koom haum sorghum mapping pejxeem hu ua sorghum conversion pejxeem (SCP) yog muab los ntawm Dr. Pat Brown ntawm University of Illinois (tam sim no ntawm UC Davis).Nws tau piav qhia yav dhau los thiab yog ib phau ntawm cov kab sib txawv hloov mus rau photoperiod-insensitivity thiab me stature los pab txhawb kev loj hlob thiab kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag hauv Teb Chaws Asmeskas ib puag ncig.510 kab los ntawm cov pej xeem no tau siv nyob rau hauv txoj kev tshawb no txawm hais tias vim muaj kev loj hlob tsis zoo thiab lwm yam teeb meem kev tswj hwm, tsis yog tag nrho cov kab no tau siv rau hauv kev tshuaj xyuas ntawm peb qhov zoo.Thaum kawg cov ntaub ntawv los ntawm 345 kab tau siv rau kev tsom xam ntawm chitin teb, 472 kab rau flg22 teb, thiab 456 rau TLS tsis kam.B. khobHom LSLP18 tau txais los ntawm Dr. Burt Bluhm ntawm University of Arkansas.

MAMP cov lus teb ntsuas

Ob qhov sib txawv MAMPs tau siv nyob rau hauv txoj kev tshawb no flg22, (Genscript catalog# RP19986), thiab chitin .Sorghum nroj tsuag tau loj hlob nyob rau hauv inserts nteg on flats uas muaj av (33% Sunshine Redi-Earth Pro Loj hlob Mix) nyob rau hauv lub tsev xog paj.Cov nroj tsuag tau watered hnub ua ntej cov qauv sau kom tsis txhob muaj nplooj ntoo ntxiv rau hnub sau.

Cov kab tau randomized thiab, rau logistical vim li cas, tau cog rau hauv batch ntawm 60 kab.Rau txhua kab, peb lub lauj kaub tau cog nrog ob lub noob rau ib kab.Cov batch tom ntej tau cog kom sai li sai tau raws li cov batch yav dhau los tau ua tiav kom txog rau thaum tag nrho cov pej xeem raug soj ntsuam.Ob qhov kev sim khiav tau ua rau ob qho tib si MAMPs nrog cov genotypes rov randomized hauv txhua qhov ntawm ob qhov kev khiav.

ROS kev ntsuam xyuas tau ua raws li tau piav qhia dhau los.Luv luv, rau txhua kab, rau cov noob tau cog rau hauv 3 lub lauj kaub sib txawv.Los ntawm qhov tshwm sim seedlings, peb raug xaiv raws li uniformity.Seedlings uas zoo nkaus li txawv txawv los yog loj dua los yog luv dua li feem ntau tsis tau siv.Plaub nplooj discs ntawm 3 hli txoj kab uas hla tau excised los ntawm qhov dav ntawm nplooj 4 ntawm peb txawv 15-hnub qub sorghum nroj tsuag.Ib daim ntawv rau ib nplooj los ntawm ob tsob ntoo thiab ob lub discs los ntawm ib tsob nroj, nrog rau qhov thib ob disc ua tus tswj dej (saib hauv qab).Cov discs tau muab tso rau ntawm tus kheej ntawm 50 µl H20 hauv lub phaj 96-zoo, muab khi nrog lub foob txhuas kom tsis txhob raug lub teeb, thiab khaws cia hauv chav sov thaum hmo ntuj.Tag kis sawv ntxov cov tshuaj tiv thaiv tau siv 2 mg/ml chemiluminescent sojntsuam L-012 (Wako, catalog #120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Type VI-A, Sigma-Aldrich, catalog # P6782), thiab 100 mg/ml Chitin los yog 2 μM ntawm Flg22.50 µl ntawm cov tshuaj tiv thaiv no tau ntxiv rau peb ntawm plaub qhov dej.Lub qhov dej thib plaub yog kev tswj hwm, uas cov tshuaj tiv thaiv tsis suav nrog MAMP tau ntxiv.Plaub qhov dej dawb uas tsuas muaj dej xwb kuj suav nrog hauv txhua lub phaj.

Tom qab ntxiv cov tshuaj tiv thaiv, cov luminescence tau ntsuas siv SynergyTM 2 multi-detection microplate nyeem ntawv (BioTek) txhua 2 min rau 1 hr.Lub phaj nyeem ntawv siv qhov ntsuas luminescence txhua 2 feeb thaum lub sijhawm no 1 teev.Cov lej ntawm tag nrho 31 qhov kev nyeem tau suav los muab tus nqi rau txhua qhov dej.Tus nqi kwv yees rau MAMP cov lus teb rau txhua tus genotype raug xam raws li (qhov nruab nrab luminescence tus nqi ntawm peb qhov kev sim - tus nqi zoo nkauj) - rho tawm qhov nruab nrab qhov tsis muaj qhov zoo.Cov txiaj ntsig ntawm qhov dej dawb tsis tu ncua nyob ze rau xoom.

Nplooj discs ntawmNicotiana benthamiana, ib kab lus siab teb (SC0003), thiab ib txoj kab uas tsis tshua muaj teb chaws (PI 6069) kuj tau suav nrog kev tswj hwm hauv txhua 96-zoo phaj rau kev tswj kom zoo.

B. khobKev npaj thiab inoculation

B. khobinoculum tau npaj raws li tau piav ua ntej.Luv luv, sorghum nplej tau soaked nyob rau hauv dej rau peb hnub, yaug, scooped rau hauv 1L conical flasks thiab autoclaved rau ib teev ntawm 15psi thiab 121 ° C.Tom qab ntawd cov nplej tau inoculated nrog txog 5 ml ntawm macerated mycelia los ntawm cov kab lis kev cai tshiabB. khobLSLP18 cais tawm thiab sab laug rau 2 lub lis piam ntawm chav tsev kub, tuav lub khob txhua 3 hnub.Tom qab 2 lub lis piam, cov fungus kis kab mob sorghum nplej tau cua qhuav thiab tom qab ntawd muab cia rau ntawm 4 ° C kom txog thaum lub teb inoculation.Tib inoculum tau siv rau tag nrho kev sim thiab ua tshiab txhua xyoo.Rau inoculation, 6-10 infested nplej tau muab tso rau hauv lub whorl ntawm 4-5 lub lis piam qub sorghum nroj tsuag.Cov spores tsim los ntawm cov kab mob no pib kis kab mob hauv cov tub ntxhais hluas sorghum nroj tsuag hauv ib lub lis piam.

Kev npaj noob

Ua ntej cog cov noob qoob loo cog qoob loo tau kho nrog cov tshuaj tua kab mob, tshuaj tua kab, thiab kev nyab xeeb sib xyaw uas muaj ~ 1% Spirato 480 FS fungicide, 4% Sebring 480 FS fungicide, 3% Sorpro 940 ES noob safer.Tom qab ntawd cov noob tau cua qhuav rau 3 hnub uas muab cov txheej nyias nyias ntawm qhov sib xyaw ntawm cov noob.Qhov kev nyab xeeb tso cai rau kev siv tshuaj tua kab mob Dual Magnum raws li kev kho mob ua ntej.

Kev ntsuam xyuas ntawm Target Leaf Spot resistance

Lub SCP tau cog rau ntawm Central Crops Research Station hauv Clayton, NC thaum Lub Rau Hli 14-15 2017 thiab Lub Rau Hli 20, 2018 nyob rau hauv ib qho randomized tiav block tsim nrog ob qhov kev sim rov ua dua hauv txhua rooj plaub.Kev sim tau cog rau hauv 1.8 m ib kab nrog 0.9 m kab dav siv 10 noob rau ib daim phiaj.Ob kab ciam teb tau cog nyob ib ncig ntawm qhov chaw ntawm txhua qhov kev sim los tiv thaiv kev cuam tshuam ntawm ntug.Cov kev sim no tau inoculated thaum Lub Xya Hli 20, 2017 thiab Lub Xya Hli 20, 2018 ntawm qhov taw tes cov nroj tsuag sorghum nyob rau theem 3. Kev ntsuam xyuas tau coj mus rau ib qho rau cuaj nplai, qhov twg cov nroj tsuag tsis pom muaj kab mob tau qhab nia raws li cuaj thiab tag nrho. cov nroj tsuag tuag tau qhab nia ua ib qho.Ob qhov kev ntsuas tau raug coj los rau hauv 2017 thiab plaub qhov kev nyeem ntawv hauv 2018 pib ob lub lis piam tom qab inoculation txhua xyoo.sAUDPC (tus qauv cheeb tsam nyob rau hauv kab mob kev loj hlob nkhaus) raug xam raws li tau piav yav tas los.


Post lub sij hawm: Apr-01-2021