Cov khoom siv cog thiab cov kab mob
Ib daim ntawv qhia txog kev sib raug zoo ntawm cov noob sorghum hu ua cov noob hloov pauv sorghum (SCP) tau muab los ntawm Dr. Pat Brown ntawm University of Illinois (tam sim no ntawm UC Davis). Nws tau piav qhia ua ntej lawm thiab yog ib pawg ntawm ntau hom kab uas hloov mus rau qhov tsis muaj zog photoperiod thiab me dua kom pab txhawb kev loj hlob thiab kev txhim kho ntawm cov nroj tsuag hauv Tebchaws Meskas. 510 kab los ntawm cov pejxeem no tau siv rau hauv txoj kev tshawb fawb no txawm hais tias vim muaj kev tawg tsis zoo thiab lwm yam teeb meem tswj xyuas zoo, tsis yog txhua kab tau siv rau hauv kev tshuaj xyuas tag nrho peb yam ntxwv. Thaum kawg cov ntaub ntawv los ntawm 345 kab tau siv rau kev tshuaj xyuas cov lus teb chitin, 472 kab rau cov lus teb flg22, thiab 456 rau kev tiv thaiv TLS.B. ua nojhom kab mob LSLP18 tau txais los ntawm Dr. Burt Bluhm ntawm University of Arkansas.
Kev ntsuas teb MAMP
Ob lub MAMPs sib txawv tau siv rau hauv txoj kev tshawb fawb no flg22, (Genscript catalog # RP19986), thiab chitin. Cov nroj tsuag sorghum tau cog rau hauv cov ntawv ntxig uas muab tso rau ntawm cov tiaj tiaj uas muaj av (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) hauv lub tsev cog khoom. Cov nroj tsuag tau ywg dej rau hnub ua ntej sau cov qauv kom tsis txhob muaj cov nplooj ntxiv rau hnub sau.
Cov kab no tau raug xaiv los ntawm kev xaiv thiab, vim yog qhov laj thawj ntawm kev thauj mus los, tau raug cog ua pawg ntawm 60 kab. Rau txhua kab, peb lub 'pots' tau raug cog nrog ob lub noob rau ib kab. Cov pawg tom ntej tau raug cog sai li sai tau thaum cov pawg dhau los tau raug ua tiav kom txog thaum tag nrho cov pej xeem tau raug soj ntsuam. Ob qhov kev sim tau ua rau ob qho tib si MAMPs nrog genotypes rov xaiv dua hauv txhua qhov kev sim.
Kev ntsuam xyuas ROS tau ua raws li tau piav qhia ua ntej. Hauv luv luv, rau txhua kab, rau noob tau cog rau hauv 3 lub lauj kaub sib txawv. Los ntawm cov noob cog qoob loo, peb tau xaiv raws li kev sib xws. Cov noob cog qoob loo uas zoo li txawv txawv lossis siab dua lossis luv dua li feem ntau tsis tau siv. Plaub daim nplooj discs ntawm 3 hli txoj kab uas hla tau raug rho tawm ntawm qhov dav tshaj plaws ntawm nplooj thib 4 ntawm peb cov nroj tsuag sorghum 15-hnub sib txawv. Ib daim disc rau ib daim nplooj los ntawm ob tsob nroj thiab ob daim disc los ntawm ib tsob nroj, nrog rau daim disc thib ob ua tus tswj dej (saib hauv qab no). Cov discs tau muab ntab rau ntawm 50 µl H20 hauv lub phaj dub 96-qhov, kaw nrog lub foob txhuas kom tsis txhob raug lub teeb, thiab khaws cia rau hauv chav sov ib hmos. Tag kis sawv ntxov tom qab, tau ua cov tshuaj tiv thaiv los ntawm kev siv 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, catalog # 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Hom VI-A, Sigma-Aldrich, catalog # P6782), thiab 100 mg/ml Chitin lossis 2 μM ntawm Flg22. 50 µl ntawm cov tshuaj tiv thaiv no tau ntxiv rau peb ntawm plaub lub qhov dej. Lub qhov dej thib plaub yog qhov kev tswj hwm mock, uas cov tshuaj tiv thaiv tsis suav nrog MAMP tau ntxiv rau. Plaub lub qhov dej dawb uas tsuas muaj dej xwb kuj tau suav nrog hauv txhua lub phaj.
Tom qab ntxiv cov tshuaj tiv thaiv, qhov ci ntsa iab tau ntsuas siv SynergyTM 2 multi-detection microplate nyeem ntawv (BioTek) txhua 2 feeb rau 1 teev. Lub phaj nyeem ntawv ntsuas qhov ci ntsa iab txhua 2 feeb thaum lub sijhawm 1 teev no. Tag nrho 31 qhov kev nyeem tau suav los muab tus nqi rau txhua lub qhov dej. Tus nqi kwv yees rau MAMP teb rau txhua genotype tau suav ua (tus nqi ci ntsa iab nruab nrab ntawm peb lub qhov dej sim - tus nqi qhov dej cuav) - rho tawm tus nqi qhov dej dawb paug nruab nrab. Cov nqi qhov dej dawb paug yeej ib txwm nyob ze rau xoom.
Cov nplooj discs ntawmNicotiana benthamiana, ib kab sorghum uas teb tau zoo (SC0003), thiab ib kab sorghum uas teb tau qis (PI 6069) kuj tau suav nrog ua kev tswj hwm hauv txhua lub phaj 96-qhov rau lub hom phiaj tswj hwm zoo.
B. ua nojkev npaj thiab kev txhaj tshuaj inoculum
B. ua nojCov tshuaj tua kab mob tau npaj raws li tau piav qhia ua ntej. Hauv luv luv, cov noob sorghum tau tsau rau hauv dej rau peb hnub, yaug, scooped rau hauv 1L conical flasks thiab autoclaved rau ib teev ntawm 15psi thiab 121 ° C. Cov noob ces tau inoculated nrog txog 5 ml ntawm macerated mycelia los ntawm ib tug tshiab kab lis kev cai ntawmB. ua nojLSLP18 cais tawm thiab tso rau 2 lub lis piam ntawm chav sov, co cov fwj txhua 3 hnub. Tom qab 2 lub lis piam, cov noob sorghum uas muaj kab mob fungal tau raug ziab hauv huab cua thiab tom qab ntawd khaws cia ntawm 4 ° C kom txog thaum muaj kab mob hauv daim teb. Cov kab mob tib yam tau siv rau tag nrho qhov kev sim thiab ua kom tshiab txhua xyoo. Rau kev txhaj tshuaj, 6-10 cov noob uas muaj kab mob tau muab tso rau hauv lub voj voog ntawm cov nroj tsuag sorghum uas muaj 4-5 lub lis piam. Cov noob uas tsim los ntawm cov kab mob fungal no pib kis tus kab mob rau cov nroj tsuag sorghum hluas hauv ib lub lis piam.
Kev npaj noob
Ua ntej cog rau hauv daim teb, cov noob sorghum tau kho nrog cov tshuaj tua kab mob fungicide, tshuaj tua kab, thiab cov tshuaj sib xyaw safener uas muaj ~ 1% Spirato 480 FS fungicide, 4% Sebring 480 FS fungicide, 3% Sorpro 940 ES noob safener. Tom qab ntawd cov noob tau ziab rau 3 hnub uas muab cov txheej nyias nyias ntawm cov sib xyaw no nyob ib puag ncig cov noob. Cov tshuaj safener tso cai rau kev siv cov tshuaj tua kab Dual Magnum ua kev kho mob ua ntej cov noob tawm.
Kev ntsuam xyuas ntawm Target Leaf Spot tiv taus
Cov SCP tau cog rau ntawm Chaw Tshawb Fawb Txog Qoob Loo Hauv Clayton, NC thaum Lub Rau Hli 14–15 2017 thiab Lub Rau Hli 20, 2018 hauv kev tsim cov thaiv tiav nrog ob qhov kev sim rov ua dua hauv txhua kis. Cov kev sim tau cog rau hauv 1.8 m ib kab nrog 0.9 m kab dav siv 10 noob rau ib daim phiaj. Ob kab ciam teb tau cog ib puag ncig ntawm txhua qhov kev sim kom tiv thaiv cov teebmeem ntug. Cov kev sim tau txhaj tshuaj rau Lub Xya Hli 20, 2017 thiab Lub Xya Hli 20, 2018 thaum lub sijhawm uas cov nroj tsuag sorghum nyob rau theem kev loj hlob 3. Kev ntsuas tau coj los ntawm ib mus rau cuaj qhov ntsuas, qhov twg cov nroj tsuag uas tsis muaj cim qhia txog kab mob tau qhab nia ua cuaj thiab cov nroj tsuag tuag tag nrho tau qhab nia ua ib. Ob qhov kev ntsuas tau coj los hauv xyoo 2017 thiab plaub qhov kev nyeem ntawv hauv xyoo 2018 pib ob lub lis piam tom qab txhaj tshuaj txhua xyoo. sAUDPC (cheeb tsam tus qauv nyob rau hauv kab mob nce qib) tau suav raws li tau piav qhia ua ntej.
Lub sijhawm tshaj tawm: Plaub Hlis-01-2021