Cov pwm Kosakonia oryziphila NP19 siv tau ua cov tshuaj txhawb kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag thiab cov tshuaj tua kab mob kom tswj tau cov kab mob nplej ntawm hom KDML105.

Daim kev tshawb fawb no qhia tau hais tias cov pwm sib txuas ntawm cov cag mov *Kosakonia oryziphila* NP19 uas cais tawm ntawm cov cag mov yog cov tshuaj tua kab mob uas txhawb kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag thiab cov tshuaj tua kab mob rau kev tswj cov kab mob mov uas tshwm sim los ntawm *Pyricularia oryzae*. Kev sim hauv vitro tau ua rau ntawm cov nplooj tshiab ntawm cov noob mov jasmine ntawm hom Khao Dawk Mali 105 (KDML105). Cov txiaj ntsig tau qhia tias NP19 tau tiv thaiv kev loj hlob ntawm *Pyricularia oryzae* conidia. Kev kis kab mob *Pyricularia oryzae* tau raug txwv nyob rau hauv peb qhov kev kho mob sib txawv: thawj zaug, mov tau raug tso rau hauv cov kab mob NP19 thiab txhaj tshuaj nrog *Pyricularia oryzae* conidia; qhov thib ob, kev sib xyaw ntawm NP19 thiab *Pyricularia oryzae* conidia tau siv rau ntawm cov nplooj;
Cov kab mob rhizosphere *Kosakonia oryziphila* NP19¹⁴tau rho tawm ntawm cov cag mov (*Oryza sativa* L. cv. RD6). *Kosakonia oryziphila* NP19 muaj cov khoom txhawb kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag, suav nrog kev kho nitrogen, kev tsim indoleacetic acid (IAA), thiab kev yaj phosphate. Qhov nthuav yog, *Kosakonia oryziphila* NP19 tsim cov chitinase^14.Kev siv cov *Kosakonia oryziphila* NP19 rau cov noob mov KDML105 tau ua rau cov mov muaj sia nyob zoo dua tom qab muaj kab mob sib kis. Lub hom phiaj ntawm txoj kev tshawb fawb no yog los (i) piav qhia txog lub tshuab tiv thaiv ntawm *Kosakonia oryziphila* NP19 tawm tsam kab mob sib kis thiab (ii) tshawb nrhiav cov txiaj ntsig ntawm *Kosakonia oryziphila* NP19 hauv kev tswj kab mob sib kis.

Cov khoom noj muaj txiaj ntsig ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev loj hlob thiab kev txhim kho ntawm cov nroj tsuag, ua lub luag haujlwm tseem ceeb uas tswj tau ntau yam kab mob me me. Cov zaub mov muaj txiaj ntsig ntawm cov nroj tsuag txiav txim siab nws txoj kev tiv thaiv kab mob, morphological lossis cov yam ntxwv ntawm cov ntaub so ntswg, thiab kev ua phem, lossis lub peev xwm kom muaj sia nyob tiv thaiv cov kab mob. Phosphorus tuaj yeem qeeb txoj kev loj hlob thiab txo qhov hnyav ntawm kev tawg ntawm cov nplej los ntawm kev ua kom muaj cov tshuaj phenolic ntau ntxiv. Potassium feem ntau txo qhov tshwm sim ntawm ntau yam kab mob nplej, xws li kev tawg ntawm cov nplej, cov kab mob nplooj, cov nplooj sheath, cov qia lwj, thiab cov nplooj. Ib txoj kev tshawb fawb los ntawm Perrenoud tau qhia tias cov chiv uas muaj potassium ntau kuj tseem tuaj yeem txo qhov tshwm sim ntawm cov kab mob fungal ntawm cov nplej thiab ua rau cov qoob loo ntau ntxiv. Ntau txoj kev tshawb fawb tau qhia tias cov chiv sulfur tuaj yeem txhim kho kev tiv thaiv qoob loo rau cov kab mob fungal.²⁷Yog muaj magnesium ntau dhau (ib feem ntawm chlorophyll) ces yuav ua rau cov mov tawg.²¹Zinc tuaj yeem tua cov kab mob ncaj qha, yog li ntawd txo qhov hnyav ntawm tus kab mob.²²Cov kev sim hauv thaj teb qhia tau tias txawm hais tias cov phosphorus, potassium, sulfur, thiab zinc ntau dua li hauv kev sim hauv lub lauj kaub, kab mob nplej tseem kis tau los ntawm nplooj nplej. Cov as-ham hauv av yuav tsis zoo rau kev tswj kab mob nplej, vim tias qhov av noo thiab qhov kub tsis zoo rau kev kis kab mob loj heev.
Hauv kev sim ua teb, Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnameniensis thiab C. gleum tau pom nyob rau hauv txhua txoj kev kho mob. Stenotrophomonas maltophilia tau raug rho tawm ntawm cov rhizosphere ntawm cov nplej, oats, dib, pob kws, thiab qos yaj ywm thiab tau pom tias muaj kev tswj hwm biocontrol.^{kev ua ub no}tawm tsam Colletotrichum nymphaeae.28 Tsis tas li ntawd, P. dispersa tau tshaj tawm tias muaj txiaj ntsig zoo tawm tsam dub^{lwj ntawm}qos liab qab zib.29 Ntxiv mus, hom kab mob R1 ntawm Xanthomonas sacchari tau ua haujlwm tawm tsam kab mob rice blast thiab panicle rot uas tshwm sim los ntawm Burkholderia.^glumae.30Burkholderia oryzae NP19 tuaj yeem tsim kom muaj kev sib raug zoo nrog cov nqaij ntawm cov mov thaum lub sijhawm tawg thiab ua rau muaj cov pwm sib koom ua ke rau qee hom mov. Thaum lwm cov kab mob hauv av tuaj yeem ua rau cov mov loj hlob tom qab hloov pauv, cov pwm tawg NP19, thaum twg tau ua rau muaj kev loj hlob lawm, cuam tshuam ntau yam hauv kev tiv thaiv cov mov tiv thaiv tus kab mob no. NP19 tsis yog tsuas yog tiv thaiv kev loj hlob ntawm P. oryzae ntau dua 50% (saib Cov Lus Qhia Ntxiv S1 hauv online appendix), tab sis kuj txo cov lej ntawm cov qhov txhab tawg ntawm nplooj thiab ua rau cov mov tau txais NP19 (RBf, RFf-B, thiab RBFf-B) hauv kev sim ua teb (Daim Duab S3).
Cov pwm Pyricularia oryzae, uas ua rau cov nroj tsuag tawg, yog cov pwm hemittrophic uas xav tau cov as-ham los ntawm cov nroj tsuag thaum muaj kev kis kab mob. Cov nroj tsuag tsim cov reactive oxygen species (ROS) los tiv thaiv kev kis kab mob fungal; txawm li cas los xij, Pyricularia oryzae siv ntau txoj hauv kev los tawm tsam ROS uas cov nroj tsuag tsim tawm.³¹Cov peroxidases zoo li ua lub luag haujlwm hauv kev tiv thaiv kab mob, suav nrog kev sib txuas ntawm cov protein phab ntsa cell, kev ua kom cov phab ntsa xylem tuab, ROS tsim tawm, thiab kev ua kom cov hydrogen peroxide tsis muaj zog.³²Cov enzymes antioxidant yuav ua haujlwm ua ib qho system tshwj xeeb rau ROS scavenging. Los ntawm lawv cov khoom antioxidant, superoxide dismutase (SOD) thiab peroxidase (POD) pab pib cov lus teb tiv thaiv, nrog SOD ua haujlwm ua thawj kab tiv thaiv.³³Hauv cov mov, cov tshuaj peroxidase ntawm cov nroj tsuag raug ua tom qab muaj kev kis tus kab mob rau cov nroj tsuag xws li *Pyricularia oryzae* thiab *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.³²Hauv kev tshawb fawb no, kev ua haujlwm peroxidase tau nce ntxiv hauv cov mov uas tau cog thiab/lossis tau txhaj tshuaj nrog *Magnaporthe oryzae* NP19; txawm li cas los xij, *Magnaporthe oryzae* tsis cuam tshuam rau kev ua haujlwm peroxidase. Superoxide dismutase (SOD), raws li H₂O₂ synthase, ua rau kev txo qis ntawm O₂⁻ mus rau H₂O₂. SOD ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev tiv thaiv cov nroj tsuag rau ntau yam kev ntxhov siab los ntawm kev sib npaug ntawm qhov concentration ntawm H₂O₂ hauv cov nroj tsuag, yog li ua kom cov nroj tsuag tiv thaiv ntau yam kev ntxhov siab³⁴. Hauv kev tshawb fawb no, hauv kev sim lauj kaub, 30 hnub tom qab *Magnaporthe oryzae* txhaj tshuaj (30 DAT), cov haujlwm SOD hauv pawg RF thiab RBF yog 121.9% thiab 104.5% siab dua li cov hauv pawg R, feem, qhia txog SOD teb rau *Magnaporthe oryzae* kev kis kab mob. Hauv ob qho kev sim hauv lauj kaub thiab hauv daim teb, cov dej num SOD hauv cov mov *Magnaporthe oryzae* NP19-inoculated yog 67.7% thiab 28.8% siab dua li cov mov uas tsis tau inoculated 30 hnub tom qab inoculated, raws li. Cov lus teb biochemical ntawm cov nroj tsuag raug cuam tshuam los ntawm ib puag ncig, qhov chaw ntxhov siab, thiab hom nroj tsuag³⁵. Cov dej num antioxidant enzyme ntawm cov nroj tsuag raug cuam tshuam ncaj qha los ntawm cov yam ntxwv ib puag ncig, uas ua rau cov dej num antioxidant enzyme ntawm cov nroj tsuag hloov pauv cov zej zog microbial ntawm cov nroj tsuag.
Cov kab mob qos yaj ywm tawg (Kosakonia oryziphila NP19, NCBI accession number PP861312) siv rau hauv txoj kev tshawb no yog hom kab mob¹³cais tawm ntawm cov hauv paus ntawm cov nplej cog RD6 hauv xeev Nakhon Phanom, Thaib teb (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). Hom kab no tau cog rau hauv cov kua zaub mov (NB) ntawm 30°C thiab 150 rpm rau 18 teev. Txhawm rau xam qhov concentration ntawm cov kab mob, qhov absorbance ntawm cov kab mob ncua ntawm 600 nm tau ntsuas. Qhov concentration ntawm cov kab mob ncua tau kho rau^10⁶CFU/mL nrog dej deionized sterile (_dH₂O). Cov kab mob pwm mov tawg (Pyricularia oryzae) tau raug txhaj rau ntawm cov qos yaj ywm dextrose agar (PDA) thiab muab tso rau ntawm 25°C rau 7 hnub. Cov kab mob mycelium tau raug hloov mus rau hauv cov khoom noj mov bran agar (2% (w/v) mov bran, 0.5% (w/v) sucrose, thiab 2% (w/v) agar yaj hauv dej deionized, pH 7) thiab muab tso rau ntawm 25°C rau 7 hnub. Ib nplooj mov uas raug kab mob (KDML105) tau muab tso rau ntawm cov mycelium kom ua rau muaj conidia thiab muab tso rau ntawm 25°C rau 5 hnub hauv qab lub teeb UV thiab lub teeb dawb. Cov conidia tau raug sau los ntawm kev so cov mycelium thiab nplooj uas muaj kab mob nrog 10 ml ntawm cov kua Tween 20 uas tau raug kab mob 0.025% (v/v) uas tau raug kab mob. Cov kua fungal tau raug lim los ntawm yim txheej ntawm cheesecloth kom tshem tawm cov mycelium, agar, thiab nplooj mov. Qhov concentration ntawm conidia hauv cov tshuaj tau raug kho rau 5 × 10⁵ conidia/ml rau kev tshuaj xyuas ntxiv.
Cov kab lis kev cai tshiab ntawm Kosakonia oryziphila NP19 hlwb tau npaj los ntawm kev cog qoob loo hauv NB medium ntawm 37 ° C rau 24 teev. Tom qab centrifugation (3047 × g, 10 feeb), cov cell pellet tau sau, ntxuav ob zaug nrog 10 mM phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.2), thiab rov ua dua hauv tib lub buffer. Qhov ceev ntawm lub cell suspension tau ntsuas ntawm 600 nm, tau txais tus nqi kwv yees li 1.0 (sib npaug rau 1.0 × 10⁷ CFU/μl txiav txim siab los ntawm plating ntawm nutrient agar plates). Conidia ntawm P. oryzae tau txais los ntawm kev ncua lawv hauv PBS kua thiab suav lawv siv lub hemocytometer. Kev ncua ntawm *K. oryziphila* NP19 thiab *P. Rau cov kev sim tshuaj nplooj, K. oryziphila* conidia tau npaj rau ntawm nplooj mov tshiab ntawm qhov concentration ntawm 1.0 × 10⁷ CFU/μL thiab 5.0 × 10² conidia/μL, raws li. Txoj kev npaj cov qauv mov yog raws li nram no: Cov nplooj 5 cm ntev los ntawm cov noob mov tau txiav tawm thiab muab tso rau hauv cov tais Petri uas muaj daim ntawv ntub dej. Tsib pawg kho tau tsim: (i) R: nplooj mov tsis muaj kab mob inoculation ua kev tswj hwm, ntxiv nrog 0.025% (v/v) Tween 20 kua; (ii) RB + F: mov inoculation nrog K. oryziphila NP19, ntxiv nrog 2 μL ntawm conidia suspension ntawm cov pwm ua rau mov tawg; (iii) R + BF: Mov hauv pawg R ntxiv nrog 4 μl ntawm cov khoom sib xyaw ntawm blast fungal conidia suspension thiab K. oryziphila NP19 (qhov ntim piv 1:1); (iv) R + F: Mov hauv pawg R ntxiv nrog 2 μl ntawm cov kab mob fungal conidia; (v) RF + B: Mov hauv pawg R ntxiv nrog 2 μl ntawm cov kab mob fungal conidia tau raug incubated rau 30 teev, thiab tom qab ntawd 2 μl ntawm K. oryziphila NP19 tau ntxiv rau tib qho chaw. Tag nrho cov tais Petri tau incubated ntawm 25 ° C hauv qhov tsaus ntuj rau 30 teev thiab tom qab ntawd muab tso rau hauv lub teeb tas mus li. Txhua pawg tau tsim ua peb daim. Tom qab 72 teev ntawm kev cog qoob loo, cov ntaub so ntswg ntawm cov nroj tsuag tau pom thiab tshuaj xyuas los ntawm kev ntsuas hluav taws xob (SEM). Hauv luv luv, cov ntaub so ntswg ntawm cov nroj tsuag tau kho rau hauv phosphate buffer uas muaj 2.5% (v/v) glutaraldehyde thiab qhuav los ntawm ntau cov tshuaj ethanol. Tom qab ziab qhov chaw tseem ceeb nrog carbon dioxide, cov qauv tau sputter-coated nrog kub thiab thaum kawg tshuaj xyuas siv lub tshuab ntsuas hluav taws xob.¹⁵