Cov protein DELLA yog cov khoom khaws cia ua tus tswvcov tshuaj tswj kev loj hlobuas ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev tswj kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag los teb rau cov lus qhia sab hauv thiab ib puag ncig. DELLA ua haujlwm ua tus tswj kev sau ntawv thiab raug xaiv los tsom cov neeg txhawb nqa los ntawm kev khi rau cov yam ntxwv sau ntawv (TFs) thiab histone H2A los ntawm nws thaj chaw GRAS. Cov kev tshawb fawb tsis ntev los no tau qhia tias DELLA kev ruaj khov yog tswj hwm tom qab kev txhais lus los ntawm ob txoj hauv kev: polyubiquitination los ntawm phytohormone gibberellin, uas ua rau nws puas tsuaj sai, thiab kev sib txuas ntawm cov khoom me me zoo li ubiquitin (SUMO) kom nce nws cov khoom sib sau ua ke. Tsis tas li ntawd, DELLA kev ua ub no yog tswj hwm los ntawm ob qho glycosylations sib txawv: kev sib cuam tshuam DELLA-TF tau txhim kho los ntawm O-fucosylation tab sis raug txwv los ntawm O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) kev hloov kho. Txawm li cas los xij, lub luag haujlwm ntawm DELLA phosphorylation tseem tsis meej, vim tias cov kev tshawb fawb yav dhau los tau qhia txog cov txiaj ntsig tsis sib xws, xws li cov uas qhia tias phosphorylation txhawb lossis txo DELLA degradation rau lwm tus uas qhia tias phosphorylation tsis cuam tshuam rau nws qhov ruaj khov. Ntawm no, peb txheeb xyuas cov chaw phosphorylation hauv REPRESSORib 1-3(RGA, AtDELLA) tau lim los ntawm Arabidopsis thaliana los ntawm kev tshuaj xyuas pawg spectrometry thiab qhia tias phosphorylation ntawm ob lub RGA peptides ntawm PolyS thiab PolyS / T thaj chaw txhawb nqa H2A khi thiab txhim kho RGA kev ua ub no. Kev koom tes ntawm RGA nrog cov neeg txhawb nqa lub hom phiaj. Qhov tseem ceeb, phosphorylation tsis cuam tshuam rau RGA-TF kev sib cuam tshuam lossis RGA kev ruaj khov. Peb txoj kev tshawb fawb qhia txog cov txheej txheem molecular uas phosphorylation ua rau DELLA kev ua ub no.
Yuav kom piav qhia txog lub luag haujlwm ntawm phosphorylation hauv kev tswj hwm DELLA kev ua haujlwm, nws yog qhov tseem ceeb kom txheeb xyuas DELLA phosphorylation qhov chaw hauv vivo thiab ua cov kev tshuaj xyuas kev ua haujlwm hauv cov nroj tsuag. Los ntawm kev ntxuav cov nroj tsuag extracts ua raws li MS / MS kev tshuaj xyuas, peb tau txheeb xyuas ntau lub phosphosites hauv RGA. Nyob rau hauv cov xwm txheej ntawm GA tsis txaus, RHA phosphorylation nce, tab sis phosphorylation tsis cuam tshuam rau nws qhov ruaj khov. Qhov tseem ceeb, co-IP thiab ChIP-qPCR assays qhia tau hais tias phosphorylation ntawm PolyS / T cheeb tsam ntawm RGA txhawb nws txoj kev sib cuam tshuam nrog H2A thiab nws txoj kev koom tes nrog cov neeg txhawb nqa lub hom phiaj, qhia txog cov txheej txheem uas phosphorylation ua rau RGA ua haujlwm.
RGA raug xaiv los tsom chromatin los ntawm kev sib cuam tshuam ntawm LHR1 subdomain nrog TF thiab tom qab ntawd khi rau H2A los ntawm nws thaj tsam PolyS/T thiab PFYRE subdomain, tsim cov H2A-RGA-TF complex los tswj RGA. Phosphorylation ntawm Pep 2 hauv thaj tsam PolyS/T ntawm DELLA domain thiab GRAS domain los ntawm kinase tsis paub tseeb txhim kho RGA-H2A kev sib txuas. Cov protein hloov pauv rgam2A tshem tawm RGA phosphorylation thiab txais yuav cov protein conformation sib txawv los cuam tshuam nrog H2A kev sib txuas. Qhov no ua rau tsis ruaj khov ntawm kev sib cuam tshuam TF-rgam2A thiab kev sib cais ntawm rgam2A los ntawm lub hom phiaj chromatin. Daim duab no qhia txog tsuas yog RGA-mediated transcriptional repression. Ib qho qauv zoo sib xws tuaj yeem piav qhia rau RGA-mediated transcriptional activation, tsuas yog tias H2A-RGA-TF complex yuav txhawb nqa lub hom phiaj gene transcription thiab dephosphorylation ntawm rgam2A yuav txo qis transcription. Daim duab hloov kho los ntawm Huang et al.21.
Tag nrho cov ntaub ntawv ntau npaum li cas tau raug tshuaj xyuas los ntawm kev siv Excel, thiab qhov sib txawv tseem ceeb tau txiav txim siab los ntawm kev siv Student's t test. Tsis muaj cov txheej txheem suav lej tau siv los txiav txim siab ua ntej qhov loj ntawm cov qauv. Tsis muaj cov ntaub ntawv raug tshem tawm ntawm kev tshuaj xyuas; qhov kev sim tsis raug xaiv ua random; cov kws tshawb fawb tsis tau dig muag rau kev faib tawm ntawm cov ntaub ntawv thaum lub sijhawm sim thiab kev ntsuam xyuas cov txiaj ntsig. Qhov loj ntawm cov qauv tau qhia nyob rau hauv daim duab piav qhia thiab cov ntaub ntawv qhov chaw.
Yog xav paub ntxiv txog kev tsim txoj kev tshawb fawb, mus saib Natural Portfolio Report Abstract uas cuam tshuam nrog tsab xov xwm no.
Cov ntaub ntawv proteomics ntawm pawg spectrometry tau muab rau ProteomeXchange consortium los ntawm PRIDE66 tus khub repository nrog cov ntaub ntawv qhia txog cov ntaub ntawv PXD046004. Tag nrho lwm cov ntaub ntawv tau txais thaum lub sijhawm kawm no tau nthuav tawm hauv Cov Ntaub Ntawv Ntxiv, Cov Ntaub Ntawv Ntxiv, thiab Cov Ntaub Ntawv Raw. Cov ntaub ntawv tau muab rau tsab xov xwm no.
Lub sijhawm tshaj tawm: Kaum Ib Hlis-08-2024