Lub caij nyoog ntawm cov nag hauv xeev Guizhou tsis sib npaug, nrog ntau dua nag thaum lub caij nplooj ntoo hlav thiab lub caij ntuj sov, tab sis cov noob rapeseed yooj yim rau kev ntxhov siab thaum lub caij nplooj zeeg thiab lub caij ntuj no, uas cuam tshuam loj heev rau cov qoob loo. Mustard yog cov qoob loo roj tshwj xeeb feem ntau cog hauv xeev Guizhou. Nws muaj kev tiv thaiv kev qhuav heev thiab tuaj yeem cog rau hauv thaj chaw roob. Nws yog ib qho chaw muaj ntau yam noob tiv taus kev qhuav. Kev tshawb pom cov noob tiv taus kev qhuav yog qhov tseem ceeb rau kev txhim kho cov noob mustard. thiab kev tsim kho tshiab hauv cov peev txheej germplasm. Tsev neeg GRF ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev loj hlob thiab kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag thiab kev teb rau kev ntxhov siab thaum qhuav. Tam sim no, cov noob GRF tau pom hauv Arabidopsis 2, mov (Oryza sativa) 12, rapeseed 13, paj rwb (Gossypium hirsutum) 14, nplej (Triticum). aestivum) 15, pearl millet (Setaria italica) 16 thiab Brassica 17, tab sis tsis muaj lus ceeb toom txog GRF noob pom hauv mustard. Hauv kev tshawb fawb no, cov noob caj noob ces GRF ntawm cov nroj tsuag mustard tau txheeb xyuas thoob plaws hauv genome thiab lawv cov yam ntxwv ntawm lub cev thiab tshuaj, kev sib raug zoo ntawm kev hloov pauv, kev sib xws, cov qauv khaws cia, cov qauv noob caj noob ces, kev sib piv ntawm cov noob caj noob ces, cis-elements thiab theem noob (plaub nplooj) tau raug tshuaj xyuas. Cov qauv kev qhia tawm hauv qab kev ntxhov siab ntawm qhov av qhuav tau raug tshuaj xyuas kom meej kom muab lub hauv paus rau kev tshawb fawb ntxiv txog kev ua haujlwm ntawm cov noob caj noob ces BjGRF hauv kev teb rau qhov av qhuav thiab los muab cov noob caj noob ces rau kev yug cov nroj tsuag mustard uas tiv taus qhov av qhuav.
Peb caug plaub lub noob caj noob ces BjGRF tau txheeb xyuas hauv Brassica juncea genome siv ob qhov kev tshawb nrhiav HMMER, txhua tus muaj cov QLQ thiab WRC domains. Cov kab ke CDS ntawm cov noob caj noob ces BjGRF tau txheeb xyuas tau nthuav tawm hauv Supplementary Table S1. BjGRF01–BjGRF34 tau muab npe raws li lawv qhov chaw nyob ntawm chromosome. Cov khoom siv physicochemical ntawm tsev neeg no qhia tau tias qhov ntev ntawm amino acid yog qhov sib txawv heev, xws li 261 aa (BjGRF19) txog 905 aa (BjGRF28). Lub isoelectric point ntawm BjGRF yog txij li 6.19 (BjGRF02) txog 9.35 (BjGRF03) nrog qhov nruab nrab ntawm 8.33, thiab 88.24% ntawm BjGRF yog cov protein yooj yim. Qhov kwv yees qhov hnyav molecular ntawm BjGRF yog txij li 29.82 kDa (BjGRF19) txog 102.90 kDa (BjGRF28); qhov tsis ruaj khov ntawm BjGRF cov protein yog txij li 51.13 (BjGRF08) txog 78.24 (BjGRF19), txhua tus loj dua 40, qhia tias cov roj fatty acid index yog txij li 43.65 (BjGRF01) txog 78.78 (BjGRF22), qhov nruab nrab hydrophilicity (GRAVY) yog txij li -1.07 (BjGRF31) txog -0.45 (BjGRF22), tag nrho cov hydrophilic BjGRF protein muaj cov nqi GRAVY tsis zoo, uas tej zaum yuav yog vim tsis muaj hydrophobicity los ntawm cov residues. Kev kwv yees qhov chaw nyob hauv subcellular qhia tau hais tias 31 BjGRF encoded proteins tuaj yeem nyob hauv lub nucleus, BjGRF04 tuaj yeem nyob hauv peroxisomes, BjGRF25 tuaj yeem nyob hauv cytoplasm, thiab BjGRF28 tuaj yeem nyob hauv chloroplasts (Rooj 1), qhia tias BjGRFs tuaj yeem nyob hauv lub nucleus thiab ua lub luag haujlwm tseem ceeb raws li tus lej sau ntawv.
Kev tshuaj xyuas phylogenetic ntawm GRF tsev neeg hauv ntau hom tsiaj tuaj yeem pab kawm txog kev ua haujlwm ntawm cov noob caj noob ces. Yog li ntawd, cov kab ke amino acid tag nrho ntawm 35 rapeseed, 16 turnip, 12 mov, 10 millet thiab 9 Arabidopsis GRFs tau rub tawm thiab tsob ntoo phylogenetic tau tsim los ntawm 34 cov noob BjGRF uas tau txheeb xyuas (Daim Duab 1). Peb lub subfamilies muaj cov lej sib txawv ntawm cov tswv cuab; 116 GRF TFs tau muab faib ua peb lub subfamilies sib txawv (pawg A ~ C), muaj 59 (50.86%), 34 (29.31%) thiab 23 (19.83)% ntawm GRFs, raws li. Ntawm lawv, 34 BjGRF tsev neeg tau tawg ua 3 lub subfamilies: 13 tus tswv cuab hauv pawg A (38.24%), 12 tus tswv cuab hauv pawg B (35.29%) thiab 9 tus tswv cuab hauv pawg C (26.47%). Hauv cov txheej txheem ntawm mustard polyploidization, tus naj npawb ntawm BjGRFs noob caj noob ces hauv cov tsev neeg sib txawv yog txawv, thiab cov noob caj noob ces loj hlob thiab poob tej zaum yuav tau tshwm sim. Nws yog ib qho tsim nyog sau cia tias tsis muaj kev faib tawm ntawm mov thiab millet GRFs hauv pawg C, thaum muaj 2 mov GRFs thiab 1 millet GRF hauv pawg B, thiab feem ntau ntawm cov mov thiab millet GRFs tau muab faib ua ib ceg, qhia tias BjGRFs muaj feem cuam tshuam nrog dicots. Ntawm lawv, kev tshawb fawb tob tshaj plaws ntawm GRF kev ua haujlwm hauv Arabidopsis thaliana muab lub hauv paus rau kev tshawb fawb txog kev ua haujlwm ntawm BjGRFs.
Tsob ntoo phylogenetic ntawm mustard suav nrog Brassica napus, Brassica napus, mov, millet thiab cov tswv cuab ntawm tsev neeg Arabidopsis thaliana GRF.
Kev tshuaj xyuas cov noob caj noob ces rov ua dua hauv tsev neeg mustard GRF. Kab grey hauv keeb kwm yav dhau los sawv cev rau ib qho thaiv sib dhos hauv cov noob caj noob ces mustard, kab liab sawv cev rau ib khub ntawm cov segmented repeats ntawm BjGRF gene;
Kev qhia tawm ntawm cov noob caj noob ces BjGRF nyob rau hauv kev ntxhov siab ntawm qhov av qhuav ntawm theem nplooj plaub. Cov ntaub ntawv qRT-PCR tau qhia nyob rau hauv Daim Ntawv Ntxiv S5. Qhov sib txawv tseem ceeb hauv cov ntaub ntawv tau qhia los ntawm cov ntawv me.
Thaum huab cua thoob ntiaj teb hloov pauv tas li, kev kawm txog seb cov qoob loo yuav ua li cas thiaj li tiv taus kev ntxhov siab ntawm cov av qhuav thiab txhim kho lawv cov txheej txheem ua siab ntev tau dhau los ua ib qho kev tshawb fawb kub18. Tom qab kev qhuav, cov qauv morphological, kev qhia txog gene thiab cov txheej txheem metabolic ntawm cov nroj tsuag yuav hloov pauv, uas yuav ua rau tsis muaj photosynthesis thiab metabolic disturbance, cuam tshuam rau cov qoob loo thiab zoo ntawm cov qoob loo19,20,21. Thaum cov nroj tsuag hnov cov cim qhia txog kev qhuav, lawv tsim cov tub txib thib ob xws li Ca2 + thiab phosphatidylinositol, ua rau cov calcium ion concentration hauv cov hlwb thiab ua kom lub network tswj hwm ntawm cov protein phosphorylation pathway22,23. Cov protein kawg yog koom nrog ncaj qha rau kev tiv thaiv cellular lossis tswj hwm kev qhia tawm ntawm cov noob caj noob ces ntxhov siab cuam tshuam los ntawm TFs, txhim kho kev kam rau cov nroj tsuag rau kev ntxhov siab24,25. Yog li, TFs ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev teb rau kev ntxhov siab ntawm cov av qhuav. Raws li cov kab ke thiab DNA khi cov khoom ntawm kev ntxhov siab ntawm cov av qhuav, TFs tuaj yeem faib ua ntau tsev neeg, xws li GRF, ERF, MYB, WRKY thiab lwm tsev neeg26.
Tsev neeg noob caj noob ces GRF yog ib hom noob caj noob ces TF uas tshwj xeeb rau cov nroj tsuag uas ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv ntau yam xws li kev loj hlob, kev txhim kho, kev xa xov thiab kev tiv thaiv cov nroj tsuag27. Txij li thaum thawj GRF noob caj noob ces tau txheeb xyuas hauv O. sativa28, ntau thiab ntau GRF noob caj noob ces tau txheeb xyuas hauv ntau hom tsiaj thiab pom tias cuam tshuam rau kev loj hlob ntawm cov nroj tsuag, kev txhim kho thiab kev ntxhov siab8, 29, 30,31,32. Nrog rau kev tshaj tawm ntawm Brassica juncea genome sequence, kev txheeb xyuas ntawm BjGRF noob caj noob ces tsev neeg tau ua tau33. Hauv kev tshawb fawb no, 34 BjGRF noob caj noob ces tau txheeb xyuas hauv tag nrho cov noob caj noob ces mustard thiab hu ua BjGRF01-BjGRF34 raws li lawv txoj haujlwm chromosomal. Tag nrho lawv muaj cov QLQ thiab WRC domains uas khaws cia zoo heev. Kev tshuaj xyuas ntawm cov khoom siv physicochemical qhia tau hais tias qhov sib txawv ntawm cov lej amino acid thiab qhov hnyav molecular ntawm BjGRF proteins (tshwj tsis yog BjGRF28) tsis tseem ceeb, qhia tias cov tswv cuab ntawm tsev neeg BjGRF yuav muaj cov haujlwm zoo sib xws. Kev tshuaj xyuas cov qauv ntawm cov noob caj noob ces qhia tau tias 64.7% ntawm cov noob caj noob ces BjGRF muaj 4 exons, qhia tias cov qauv ntawm cov noob caj noob ces BjGRF tseem nyob ruaj khov hauv kev hloov pauv, tab sis tus lej ntawm cov exons hauv cov noob caj noob ces BjGRF10, BjGRF16, BjGRP28 thiab BjGRF29 loj dua. Cov kev tshawb fawb tau qhia tias kev ntxiv lossis rho tawm cov exons lossis introns tuaj yeem ua rau muaj qhov sib txawv ntawm cov qauv thiab kev ua haujlwm ntawm cov noob caj noob ces, yog li tsim cov noob caj noob ces tshiab34,35,36. Yog li ntawd, peb xav tias cov intron ntawm BjGRF ploj mus thaum lub sijhawm hloov pauv, uas yuav ua rau muaj kev hloov pauv hauv kev ua haujlwm ntawm cov noob caj noob ces. Sib xws nrog cov kev tshawb fawb uas twb muaj lawm, peb kuj pom tias tus lej ntawm cov introns cuam tshuam nrog kev qhia tawm ntawm cov noob caj noob ces. Thaum tus lej ntawm cov introns hauv ib lub noob caj noob ces loj, cov noob caj noob ces tuaj yeem teb sai rau ntau yam tsis zoo.
Kev luam cov noob caj noob ces yog ib qho tseem ceeb hauv kev hloov pauv ntawm genomic thiab genetic37. Cov kev tshawb fawb cuam tshuam tau qhia tias kev luam cov noob caj noob ces tsis yog tsuas yog ua rau muaj ntau cov noob caj noob ces GRF xwb, tab sis kuj ua rau muaj kev tsim cov noob caj noob ces tshiab los pab cov nroj tsuag hloov kho rau ntau yam xwm txheej tsis zoo38. Tag nrho muaj 48 khub noob caj noob ces zoo sib xws tau pom hauv kev tshawb fawb no, tag nrho cov no yog kev luam cov noob caj noob ces, qhia tias kev luam cov noob caj noob ces yog lub hauv paus tseem ceeb rau kev ua kom muaj ntau cov noob caj noob ces hauv tsev neeg no. Nws tau tshaj tawm hauv cov ntaub ntawv tias kev luam cov noob caj noob ces tuaj yeem txhawb kev nthuav dav ntawm cov tswv cuab ntawm tsev neeg GRF hauv Arabidopsis thiab strawberry, thiab tsis muaj kev luam cov noob caj noob ces no hauv ib hom tsiaj twg27,39. Cov txiaj ntsig ntawm kev tshawb fawb no yog sib xws nrog cov kev tshawb fawb uas twb muaj lawm ntawm Arabidopsis thaliana thiab strawberry tsev neeg, qhia tias tsev neeg GRF tuaj yeem ua rau muaj ntau cov noob caj noob ces thiab tsim cov noob caj noob ces tshiab los ntawm kev luam cov noob caj noob ces hauv cov nroj tsuag sib txawv.
Hauv kev tshawb fawb no, tag nrho muaj 34 lub noob BjGRF tau txheeb xyuas hauv cov nroj tsuag mustard, uas tau muab faib ua 3 pawg me. Cov noob no tau qhia txog cov qauv zoo sib xws thiab cov qauv noob. Kev tshuaj xyuas Collinearity tau qhia txog 48 khub ntawm cov ntu sib dhos hauv cov nroj tsuag mustard. Thaj chaw txhawb nqa BjGRF muaj cov ntsiab lus cis-acting uas cuam tshuam nrog kev teb lub teeb, kev teb tshuaj hormones, kev teb kev ntxhov siab ib puag ncig, thiab kev loj hlob thiab kev txhim kho. Kev qhia tawm ntawm 34 lub noob BjGRF tau pom ntawm theem noob mustard (cag, qia, nplooj), thiab cov qauv qhia tawm ntawm 10 lub noob BjGRF nyob rau hauv cov xwm txheej qhuav. Nws tau pom tias cov qauv qhia tawm ntawm cov noob BjGRF nyob rau hauv kev ntxhov siab qhuav zoo sib xws thiab tej zaum yuav zoo sib xws. Kev koom tes hauv kev qhuav yuam kev tswj hwm. BjGRF03 thiab BjGRF32 noob yuav ua lub luag haujlwm tswj hwm zoo hauv kev ntxhov siab qhuav, thaum BjGRF06 thiab BjGRF23 ua lub luag haujlwm hauv kev ntxhov siab qhuav raws li miR396 lub hom phiaj noob. Zuag qhia tag nrho, peb txoj kev tshawb fawb muab lub hauv paus biological rau kev tshawb pom yav tom ntej ntawm BjGRF gene ua haujlwm hauv cov nroj tsuag Brassicaceae.
Cov noob mustard siv rau hauv qhov kev sim no yog muab los ntawm Guizhou Oil Seed Research Institute, Guizhou Academy of Agricultural Sciences. Xaiv tag nrho cov noob thiab cog rau hauv av (substrate: av = 3: 1), thiab sau cov hauv paus hniav, cov qia thiab nplooj tom qab plaub-nplooj theem. Cov nroj tsuag tau kho nrog 20% PEG 6000 los ua piv txwv txog kev qhuav, thiab cov nplooj tau sau tom qab 0, 3, 6, 12 thiab 24 teev. Tag nrho cov qauv nroj tsuag tau khov tam sim ntawd hauv cov kua nitrogen thiab tom qab ntawd khaws cia rau hauv lub tub yees -80 ° C rau qhov kev sim tom ntej.
Tag nrho cov ntaub ntawv tau txais los yog tshuaj xyuas thaum lub sijhawm tshawb fawb no suav nrog hauv tsab xov xwm luam tawm thiab cov ntaub ntawv ntxiv.
Lub sijhawm tshaj tawm: Lub Ib Hlis-22-2025