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Cov tshuaj tua kab mob feem ntau siv thaum lub sijhawm paj ntoo thiab tuaj yeem ua rau cov kab uas ua rau cov kab tsuag puas tsuaj. Txawm li cas los xij, me ntsis paub txog seb cov kab uas tsis yog muv (piv txwv li, cov muv ib leeg, Osmia cornifrons) teb li cas rau kev sib cuag thiab cov tshuaj tua kab mob uas feem ntau siv rau ntawm cov txiv apples thaum lub sijhawm paj. Qhov kev paub no txwv tsis pub cov kev txiav txim siab txog kev txiav txim siab txog kev nyab xeeb thiab lub sijhawm ntawm kev txau tshuaj tua kab mob. Peb tau soj ntsuam cov teebmeem ntawm ob hom tshuaj tua kab mob sib cuag (captan thiab mancozeb) thiab plaub hom tshuaj tua kab mob interlayer/phytosystem (ciprocycline, myclobutanil, pyrostrobin thiab trifloxystrobin). Cov teebmeem ntawm qhov hnyav ntawm cov kab mob nce, kev ciaj sia, kev sib piv ntawm poj niam txiv neej thiab ntau yam kab mob. Kev ntsuam xyuas tau ua tiav los ntawm kev siv tshuaj bioassay ntev uas cov paj ntoos tau kho hauv peb koob tshuaj raws li cov koob tshuaj pom zoo tam sim no rau kev siv hauv thaj teb (1X), ib nrab koob tshuaj (0.5X) thiab koob tshuaj qis (0.1X). Txhua koob tshuaj ntawm mancozeb thiab pyritisoline txo qhov hnyav ntawm lub cev thiab kev ciaj sia ntawm cov kab mob. Tom qab ntawd peb tau txheeb xyuas cov noob caj noob ces 16S los piav qhia txog cov kab mob larval bacteriome ntawm mancozeb, cov tshuaj tua kab mob fungal uas ua rau muaj kev tuag ntau tshaj plaws. Peb pom tias ntau haiv neeg thiab ntau yam kab mob tau txo qis hauv cov kab mob larval uas noj cov paj ntoos uas kho nrog mancozeb. Peb cov txiaj ntsig ntawm kev kuaj mob qhia tias kev txau qee cov tshuaj tua kab mob fungal no thaum lub sijhawm paj yog qhov txaus ntshai rau kev noj qab haus huv ntawm O. cornifrons. Cov ntaub ntawv no muaj feem cuam tshuam rau kev txiav txim siab tswj hwm yav tom ntej txog kev siv cov khoom tiv thaiv ntoo txiv hmab txiv ntoo kom ruaj khov thiab ua lub hauv paus rau cov txheej txheem tswj hwm uas tsom mus rau kev tiv thaiv cov kab mob pollinator.
Tus kab mason uas nyob ib leeg hu ua Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) tau coj los rau Tebchaws Meskas los ntawm Nyiv Pooj thaum xyoo 1970s thiab thaum ntxov xyoo 1980s, thiab hom kab no tau ua lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev tswj hwm ecosystem txij thaum ntawd los. Cov pej xeem ntuj ntawm cov kab no yog ib feem ntawm kwv yees li 50 hom kab qus uas ua tiav cov kab uas pollinate almond thiab apple orchards hauv Tebchaws Meskas2,3. Cov kab Mason ntsib ntau yam teeb meem, suav nrog kev sib cais ntawm qhov chaw nyob, cov kab mob, thiab cov tshuaj tua kab3,4. Ntawm cov tshuaj tua kab, cov tshuaj tua kab mob txo qhov kev nce zog, kev nrhiav zaub mov5 thiab kev kho lub cev6,7. Txawm hais tias kev tshawb fawb tsis ntev los no qhia tias kev noj qab haus huv ntawm Mason bees raug cuam tshuam ncaj qha los ntawm cov kab mob commensal thiab ectobactic,8,9 vim tias cov kab mob thiab cov fungi tuaj yeem cuam tshuam rau kev noj haus thiab kev tiv thaiv kab mob, cov teebmeem ntawm kev raug fungicide rau ntau haiv neeg ntawm cov kab mob Mason bees nyuam qhuav pib kawm.
Cov tshuaj tua kab mob fungal uas muaj ntau yam teebmeem (kev sib cuag thiab kev ua haujlwm thoob plaws) raug txau rau hauv cov vaj txiv hmab ua ntej thiab thaum lub sijhawm paj kom kho cov kab mob xws li kua txiv apple scab, iab lwj, xim av lwj thiab powdery mildew10,11. Cov tshuaj tua kab mob fungal suav tias tsis muaj teeb meem rau cov kab mob pollinators, yog li lawv raug pom zoo rau cov neeg ua teb thaum lub sijhawm paj; Kev raug thiab noj cov tshuaj tua kab mob fungal no los ntawm cov muv yog qhov paub zoo, vim nws yog ib feem ntawm cov txheej txheem sau npe tshuaj tua kab los ntawm US Environmental Protection Agency thiab ntau lwm lub koom haum tswj hwm hauv tebchaws12,13,14. Txawm li cas los xij, cov teebmeem ntawm fungicides rau cov tsis yog muv tsis paub ntau vim tias lawv tsis tas yuav tsum muaj nyob rau hauv cov ntawv cog lus tso cai lag luam hauv Tebchaws Meskas15. Tsis tas li ntawd, feem ntau tsis muaj cov txheej txheem txheem rau kev sim cov muv ib leeg16,17, thiab kev tswj cov pawg uas muab cov muv rau kev sim yog qhov nyuaj18. Kev sim ntawm ntau hom muv tswj hwm tau ua ntau dua hauv Tebchaws Europe thiab Tebchaws Meskas los kawm txog cov teebmeem ntawm cov tshuaj tua kab rau cov muv qus, thiab cov txheej txheem txheem tau tsim tsis ntev los no rau O. cornifrons19.
Cov muv uas muaj pob ntseg yog cov monocytes thiab siv rau hauv kev lag luam hauv cov qoob loo carp ua cov khoom ntxiv lossis hloov rau cov muv zib ntab. Cov muv no tawm ntawm lub Peb Hlis thiab Lub Plaub Hlis, nrog rau cov txiv neej precocious tawm peb mus rau plaub hnub ua ntej cov poj niam. Tom qab sib yuav, tus poj niam nquag sau cov paj ntoos thiab nectar los muab cov qe menyuam hauv lub qhov ntawm lub zes tubular (ntuj lossis dag)1,20. Cov qe raug tso rau ntawm paj ntoos hauv cov hlwb; tus poj niam tom qab ntawd tsim ib phab ntsa av nplaum ua ntej npaj lub hlwb tom ntej. Cov kab menyuam thawj zaug raug kaw hauv chorion thiab noj cov kua embryonic. Txij li thaum thib ob mus rau theem thib tsib (prepupa), cov kab menyuam noj paj ntoos22. Thaum cov paj ntoos tsis muaj tag nrho, cov kab menyuam tsim cov cocoons, pupate thiab tawm los ua cov neeg laus hauv tib lub brood chamber, feem ntau yog thaum lub caij ntuj sov lig20,23. Cov neeg laus tawm hauv lub caij nplooj ntoo hlav tom ntej. Cov neeg laus muaj sia nyob yog cuam tshuam nrog kev nce zog (qhov hnyav nce) raws li kev noj zaub mov. Yog li, qhov zoo ntawm cov paj ntoos, nrog rau lwm yam xws li huab cua lossis kev raug tshuaj tua kab, yog cov txiav txim siab ntawm kev muaj sia nyob thiab kev noj qab haus huv24.
Cov tshuaj tua kab thiab cov tshuaj tua kab mob uas siv ua ntej paj tuaj yeem txav mus rau hauv cov hlab ntsha ntawm cov nroj tsuag mus rau ntau qib, los ntawm translaminar (piv txwv li, tuaj yeem txav mus los ntawm sab saud ntawm nplooj mus rau sab qis, zoo li qee cov tshuaj tua kab mob) 25 mus rau cov teebmeem tiag tiag. , uas tuaj yeem nkag mus rau hauv lub kaus mom los ntawm cov hauv paus hniav, tuaj yeem nkag mus rau hauv cov kua txiv hmab txiv ntoo ntawm cov paj txiv apple26, qhov chaw uas lawv tuaj yeem tua cov neeg laus O. cornifrons27. Qee cov tshuaj tua kab mob kuj leach rau hauv paj ntoos, cuam tshuam rau kev loj hlob ntawm cov kab laug sab thiab ua rau lawv tuag19. Lwm cov kev tshawb fawb tau qhia tias qee cov tshuaj tua kab mob tuaj yeem hloov pauv tus cwj pwm ntawm cov tsiaj O. lignaria28. Tsis tas li ntawd, kev tshawb fawb hauv chaw kuaj mob thiab thaj chaw ua piv txwv txog cov xwm txheej raug tshuaj tua kab mob (suav nrog cov tshuaj tua kab mob) tau qhia tias cov tshuaj tua kab mob cuam tshuam tsis zoo rau lub cev 22 morphology 29 thiab kev ciaj sia ntawm cov muv zib ntab thiab qee cov muv ib leeg. Ntau yam tshuaj tua kab mob uas siv ncaj qha rau cov paj qhib thaum lub sijhawm paj tuaj yeem ua rau cov paj ntoos uas cov neeg laus sau rau kev loj hlob ntawm cov kab laug sab, cov teebmeem ntawm cov uas tseem yuav tsum tau kawm30.
Nws tau lees paub ntau ntxiv tias kev loj hlob ntawm cov kab mob me me yog cuam tshuam los ntawm cov paj ntoos thiab cov zej zog microbial ntawm lub cev zom zaub mov. Cov kab mob me me ntawm cov muv muv cuam tshuam rau cov yam ntxwv xws li lub cev hnyav31, kev hloov pauv metabolic22 thiab kev cuam tshuam rau cov kab mob pathogen32. Cov kev tshawb fawb yav dhau los tau tshuaj xyuas qhov cuam tshuam ntawm theem kev loj hlob, cov as-ham, thiab ib puag ncig ntawm cov kab mob me me ntawm cov muv ib leeg. Cov kev tshawb fawb no tau qhia txog qhov zoo sib xws hauv cov qauv thiab kev nplua mias ntawm cov kab mob me me thiab cov paj ntoos microbiomes33, nrog rau cov kab mob feem ntau Pseudomonas thiab Delftia, ntawm cov kab mob ib leeg. Txawm li cas los xij, txawm hais tias cov tshuaj tua kab mob tau cuam tshuam nrog cov tswv yim los tiv thaiv kev noj qab haus huv ntawm cov muv, cov teebmeem ntawm cov tshuaj tua kab mob rau cov kab mob me me los ntawm kev raug qhov ncauj ncaj qha tseem tsis tau tshawb nrhiav.
Daim ntawv tshawb fawb no tau sim cov teebmeem ntawm cov koob tshuaj tua kab mob uas siv rau hauv lub ntiaj teb tiag tiag uas tau sau npe siv rau cov txiv hmab txiv ntoo hauv Tebchaws Meskas, suav nrog kev sib cuag thiab kev sib kis kab mob fungal uas tau muab rau cov kab mob hornworm pob kws los ntawm cov zaub mov uas muaj kuab paug. Peb pom tias kev sib cuag thiab kev sib kis kab mob fungal txo qhov hnyav ntawm cov kab mob thiab ua rau cov neeg tuag ntau ntxiv, nrog rau cov teebmeem hnyav tshaj plaws uas cuam tshuam nrog mancozeb thiab pyrithiopide. Tom qab ntawd peb piv rau cov kab mob sib txawv ntawm cov kab mob uas tau noj cov zaub mov paj ntoos uas tau kho mancozeb nrog cov uas tau noj cov zaub mov tswj. Peb tham txog cov txheej txheem uas ua rau muaj kev tuag thiab cov teebmeem rau kev tswj cov kab tsuag thiab cov kab mob pollinator (IPPM)36 cov kev pab cuam.
Cov neeg laus O. cornifrons uas nyob hauv lub caij ntuj no hauv cov cocoons tau txais los ntawm Fruit Research Center, Biglerville, PA, thiab khaws cia ntawm −3 txog 2 ° C (± 0.3 ° C). Ua ntej kev sim (600 cocoons tag nrho). Thaum lub Tsib Hlis 2022, 100 O. cornifrons cocoons tau hloov mus rau hauv cov khob yas txhua hnub (50 cocoons ib khob, DI 5 cm × 15 cm ntev) thiab cov ntaub so tau muab tso rau hauv cov khob kom txhawb kev qhib thiab muab cov khoom noj uas zom tau, txo kev ntxhov siab rau cov muv pob zeb37. Muab ob lub khob yas uas muaj cocoons tso rau hauv lub tawb kab (30 × 30 × 30 cm, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) nrog 10 ml feeders uas muaj 50% sucrose kua thiab khaws cia rau plaub hnub kom ntseeg tau tias kaw thiab sib deev. 23 ° C, av noo txheeb ze 60%, photoperiod 10 l (qhov muaj zog tsawg): 14 hnub. 100 tus poj niam thiab txiv neej uas tau sib yuav tau raug tso tawm txhua tag kis rau rau hnub (100 tus ib hnub) rau hauv ob lub zes cuav thaum lub sijhawm paj txiv apple loj tshaj plaws (lub zes ntxiab: dav 33.66 × siab 30.48 × ntev 46.99 cm; Daim Duab Ntxiv 1). Muab tso rau ntawm Pennsylvania State Arboretum, ze ntawm txiv ntoo cherry (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), txiv duaj (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), txiv pear (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia 'Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), tsob ntoo kua coronaria (Malus coronaria) thiab ntau hom ntoo kua (Malus coronaria, Malus), tsob ntoo kua hauv tsev 'Co-op 30′ Enterprise™, tsob ntoo kua Malus 'Co-Op 31′ Winecrisp™, begonia 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy'). Txhua lub tsev noog yas xiav haum rau saum ob lub thawv ntoo. Txhua lub thawv zes muaj 800 lub raj ntawv kraft khoob (kauv qhib, 0.8 cm ID × 15 cm L) (Jonesville Paper Tube Co., Michigan) ntxig rau hauv cov raj cellophane opaque (0.7 OD saib Cov ntsaws yas (T-1X plugs) muab qhov chaw ua zes.
Ob lub thawv zes qe tig mus rau sab hnub tuaj thiab tau npog nrog cov yas ntsuab vaj laj kab (Everbilt qauv # 889250EB12, qhov loj qhib 5 × 5 cm, 0.95 m × 100 m) kom tiv thaiv cov nas thiab noog nkag mus thiab muab tso rau ntawm qhov av ib sab ntawm lub thawv zes qe. Lub thawv zes qe (Daim Duab Ntxiv 1a). Cov qe borer pob kws tau sau txhua hnub los ntawm kev sau 30 lub raj los ntawm cov zes thiab thauj lawv mus rau chav kuaj mob. Siv txiab, txiav qhov kawg ntawm lub raj, tom qab ntawd rhuav lub raj kauv kom pom cov qe brood. Cov qe ib leeg thiab lawv cov paj ntoos tau raug tshem tawm siv lub spatula nkhaus (Microslide tool kit, BioQuip Products Inc., California). Cov qe tau incubated rau ntawm daim ntawv lim dej ntub thiab muab tso rau hauv lub tais Petri rau 2 teev ua ntej siv rau hauv peb cov kev sim (Daim Duab Ntxiv 1b-d).
Hauv chav kuaj mob, peb tau soj ntsuam qhov kev lom ntawm rau yam tshuaj tua kab mob uas siv ua ntej thiab thaum lub sijhawm txiv apple tawg paj ntawm peb qhov concentration (0.1X, 0.5X, thiab 1X, qhov twg 1X yog qhov cim siv rau 100 nkas loos dej/acre. Cov koob tshuaj ntau hauv daim teb = concentration hauv daim teb). , Rooj 1). Txhua qhov concentration tau rov ua dua 16 zaug (n = 16). Ob hom tshuaj tua kab mob sib cuag (Rooj S1: mancozeb 2696.14 ppm thiab captan 2875.88 ppm) thiab plaub hom tshuaj tua kab mob systemic (Rooj S1: pyrithiostrobin 250.14 ppm; trifloxystrobin 110.06 ppm; myclobutanil azole 75.12 ppm; cyprodinil 280.845 ppm) kev lom rau txiv hmab txiv ntoo, zaub thiab cov qoob loo zoo nkauj. Peb tau sib xyaw cov paj ntoos siv lub tshuab sib tsoo, hloov 0.20 g mus rau hauv lub qhov (24-qhov Falcon Plate), thiab ntxiv thiab sib tov 1 μL ntawm cov tshuaj fungicide los ua cov paj ntoos pyramidal nrog 1 hli tob qhov uas cov qe tau muab tso rau hauv. Muab tso rau hauv siv lub spatula me me (Daim Duab Ntxiv 1c, d). Cov phaj Falcon tau khaws cia rau ntawm chav tsev kub (25 ° C) thiab 70% qhov av noo. Peb piv rau lawv nrog cov kab laug sab tswj hwm noj cov khoom noj paj ntoos sib xyaw kho nrog dej ntshiab. Peb sau cov neeg tuag thiab ntsuas qhov hnyav ntawm cov kab laug sab txhua ob hnub kom txog thaum cov kab laug sab mus txog hnub nyoog prepupal siv qhov sib npaug analytical (Fisher Scientific, qhov tseeb = 0.0001 g). Thaum kawg, qhov sib piv ntawm poj niam txiv neej tau ntsuas los ntawm kev qhib lub cocoon tom qab 2.5 lub hlis.
DNA tau rho tawm los ntawm tag nrho cov kab mob O. cornifrons (n = 3 ib qho kev kho mob, cov paj ntoos uas tau kho mancozeb thiab tsis tau kho) thiab peb tau ua qhov kev tshuaj xyuas ntau haiv neeg ntawm cov qauv no, tshwj xeeb tshaj yog vim hauv mancozeb qhov kev tuag siab tshaj plaws tau pom hauv cov kab mob. tau txais MnZn. DNA tau amplified, purified siv DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA kit (Zymo Research, Irvine, CA), thiab sequenced (600 cycles) ntawm Illumina® MiSeq™ siv v3 kit. Targeted sequencing ntawm cov kab mob 16S ribosomal RNA genes tau ua tiav siv Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) siv cov primers tsom mus rau thaj tsam V3-V4 ntawm 16S rRNA gene. Tsis tas li ntawd, 18S sequencing tau ua tiav siv 10% PhiX inclusion, thiab amplification tau ua tiav siv primer khub 18S001 thiab NS4.
Ntshuam thiab ua cov kev nyeem ua khub39 siv QIIME2 pipeline (v2022.11.1). Cov kev nyeem no tau raug txiav thiab sib koom ua ke, thiab cov kab ke chimeric tau raug tshem tawm siv DADA2 plugin hauv QIIME2 (qiime dada2 suab nrov sib koom ua ke)40. Cov kev faib chav kawm 16S thiab 18S tau ua tiav siv cov khoom faib plugin Classify-sklearn thiab cov khoom siv uas tau kawm ua ntej silva-138-99-nb-classifier.
Tag nrho cov ntaub ntawv sim tau raug kuaj xyuas rau qhov ib txwm muaj (Shapiro-Wilks) thiab kev sib xws ntawm kev hloov pauv (Levene's test). Vim tias cov ntaub ntawv teeb tsa tsis tau raws li qhov kev xav ntawm kev tshuaj xyuas parametric thiab kev hloov pauv tsis ua tiav los ua kom cov seem seem, peb tau ua qhov tsis yog parametric ob-txoj kev ANOVA (Kruskal-Wallis) nrog ob yam [lub sijhawm (peb-theem 2, 5, thiab 8 hnub lub sijhawm ntsiab lus) thiab fungicide] los ntsuas qhov cuam tshuam ntawm kev kho mob rau qhov hnyav tshiab ntawm cov kab mob larval, tom qab ntawd kev sib piv post hoc nonparametric pairwise tau ua tiav siv qhov kev xeem Wilcoxon. Peb siv tus qauv dav dav (GLM) nrog Poisson faib los sib piv cov teebmeem ntawm fungicides rau kev ciaj sia nyob thoob plaws peb qhov kev sib xyaw fungicide41,42. Rau kev tshuaj xyuas qhov sib txawv ntawm qhov ntau thiab tsawg, tus lej ntawm cov kab sib txawv ntawm amplicon (ASVs) tau tawg ntawm qib genus. Kev sib piv ntawm qhov muaj ntau yam sib txawv ntawm cov pab pawg siv 16S (qib genus) thiab 18S qhov muaj ntau yam sib piv tau ua tiav siv tus qauv ntxiv dav dav rau txoj haujlwm, nplai, thiab duab (GAMLSS) nrog beta xoom-inflated (BEZI) tsev neeg faib tawm, uas tau ua qauv rau ntawm macro. hauv Microbiome R43 (v1.1). 1). Tshem tawm cov hom mitochondrial thiab chloroplast ua ntej kev tshuaj xyuas sib txawv. Vim yog cov qib taxonomic sib txawv ntawm 18S, tsuas yog qib qis tshaj plaws ntawm txhua taxon tau siv rau kev tshuaj xyuas sib txawv. Txhua qhov kev tshuaj xyuas suav txheeb tau ua tiav siv R (v. 3.4.3., CRAN project) (Pab Pawg 2013).
Kev raug tshuaj mancozeb, pyrithiostrobin, thiab trifloxystrobin ua rau cov kab O. cornifrons hnyav dua (Daim Duab 1). Cov teebmeem no tau pom tas li rau tag nrho peb koob tshuaj uas tau soj ntsuam (Daim Duab 1a-c). Cyclostrobin thiab myclobutanil tsis ua rau cov kab me me hnyav dua.
Qhov hnyav nruab nrab ntawm cov kab laug sab hauv paus ntsuas ntawm peb lub sijhawm nyob rau hauv plaub qhov kev kho mob (kev noj paj ntoos sib xws + tshuaj tua kab mob fungal: kev tswj hwm, 0.1X, 0.5X thiab 1X koob tshuaj). (a) Koob tshuaj qis (0.1X): thawj zaug (hnub 1): χ2: 30.99, DF = 6; P < 0.0001, thib ob (hnub 5): 22.83, DF = 0.0009; thib peb; koob tshuaj (hnub 8): χ2: 28.39, DF = 6; (b) ib nrab koob tshuaj (0.5X): thawj zaug (hnub 1): χ2: 35.67, DF = 6; P < 0.0001, thib ob (hnub ib). ): χ2: 15.98, DF = 6; P = 0.0090; Lub sijhawm thib peb (hnub 8) χ2: 16.47, DF = 6; (c) Qhov chaw lossis koob tshuaj tag nrho (1X): lub sijhawm thawj zaug (hnub 1) χ2: 20.64, P = 6; P = 0.0326, lub sijhawm thib ob (hnub 5): χ2: 22.83, DF = 6; P = 0.0009; lub sijhawm thib peb (hnub 8): χ2: 28.39, DF = 6; kev tshuaj xyuas tsis yog parametric ntawm qhov sib txawv. Cov kab sawv cev rau qhov nruab nrab ± SE ntawm kev sib piv pairwise (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
Thaum siv tshuaj trifloxystrobin tsawg kawg nkaus (0.1X), qhov hnyav ntawm cov kab me me tau txo qis 60%, mancozeb tau 49%, myclobutanil tau 48%, thiab pyrithistrobin tau 46% (Daim Duab 1a). Thaum siv tshuaj mancozeb ib nrab ntawm cov tshuaj no (0.5X), qhov hnyav ntawm cov kab me me tau txo qis 86%, pyrithiostrobin tau 52% thiab trifloxystrobin tau 50% (Daim Duab 1b). Yog siv tshuaj mancozeb tag nrho (1X) ces qhov hnyav ntawm cov kab me me tau txo qis 82%, pyrithiostrobin tau 70%, thiab trifloxystrobin, myclobutanil thiab sangard tau kwv yees li 30% (Daim Duab 1c).
Kev tuag ntau tshaj plaws ntawm cov kab me me uas noj paj ntoos uas kho nrog mancozeb, ua raws li pyrithiostrobin thiab trifloxystrobin. Kev tuag nce ntxiv thaum noj mancozeb thiab pyritisoline ntau ntxiv (Daim Duab 2; Rooj 2). Txawm li cas los xij, kev tuag ntawm cov kab laum pob kws tsuas yog nce me ntsis thaum cov tshuaj trifloxystrobin ntau ntxiv; cyprodinil thiab captan tsis ua rau kev tuag ntau ntxiv piv rau cov tshuaj tswj.
Kev tuag ntawm cov kab laug sab borer tau muab piv rau tom qab noj cov paj ntoos uas tau kho nrog rau rau hom tshuaj tua kab mob sib txawv. Mancozeb thiab pentopyramide muaj kev rhiab heev dua rau qhov ncauj rau cov kab laug sab pob kws (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (kab, qhov siab = 0.29, P < 0.001; qhov siab = 0.24, P < 0.00)).
Qhov nruab nrab, thoob plaws txhua qhov kev kho mob, 39.05% ntawm cov neeg mob yog poj niam thiab 60.95% yog txiv neej. Ntawm cov kev kho mob tswj, feem pua ntawm cov poj niam yog 40% hauv ob qho kev tshawb fawb tsawg-koob tshuaj (0.1X) thiab ib nrab-koob tshuaj (0.5X), thiab 30% hauv kev tshawb fawb teb-koob tshuaj (1X). Ntawm 0.1X koob tshuaj, ntawm cov kab laug sab uas pub paj ntoos kho nrog mancozeb thiab myclobutanil, 33.33% ntawm cov neeg laus yog poj niam, 22% ntawm cov neeg laus yog poj niam, 44% ntawm cov kab laug sab laus yog poj niam, 44% ntawm cov kab laug sab laus yog poj niam. poj niam, 41% ntawm cov kab laug sab laus yog poj niam, thiab cov kev tswj yog 31% (Daim duab 3a). Thaum noj tshuaj 0.5 npaug ntawm cov tshuaj, 33% ntawm cov kab laus hauv pawg mancozeb thiab pyrithiostrobin yog poj niam, 36% hauv pawg trifloxystrobin, 41% hauv pawg myclobutanil, thiab 46% hauv pawg cyprostrobin. Tus lej no yog 53% hauv pawg. hauv pawg captan thiab 38% hauv pawg tswj (Daim Duab 3b). Thaum noj tshuaj 1X, 30% ntawm pawg mancozeb yog poj niam, 36% ntawm pawg pyrithiostrobin, 44% ntawm pawg trifloxystrobin, 38% ntawm pawg myclobutanil, 50% ntawm pawg tswj yog poj niam - 38.5% (Daim Duab 3c).
Feem pua ntawm cov kab poj niam thiab cov txiv neej uas muaj kab tom qab raug cov tshuaj tua kab mob fungal theem larval. (a) Koob tshuaj tsawg (0.1X). (b) Ib nrab koob tshuaj (0.5X). (c) Koob tshuaj hauv thaj teb lossis koob tshuaj tag nrho (1X).
Kev tshuaj xyuas 16S sequence qhia tau hais tias pawg kab mob sib txawv ntawm cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas kho mancozeb thiab cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas tsis kho (Daim Duab 4a). Cov ntsuas microbial ntawm cov kab mob me me uas tsis kho uas noj paj ntoos siab dua li cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas kho mancozeb (Daim Duab 4b). Txawm hais tias qhov sib txawv ntawm kev nplua nuj ntawm cov pab pawg tsis tseem ceeb, nws qis dua li qhov pom rau cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas tsis kho (Daim Duab 4c). Kev nplua nuj sib piv qhia tau hais tias cov kab mob me me ntawm cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas tswj tau muaj ntau yam sib txawv dua li cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas kho mancozeb (Daim Duab 5a). Kev tshuaj xyuas piav qhia tau qhia tias muaj 28 hom kab mob me me hauv cov qauv tswj thiab cov qauv kho mancozeb (Daim Duab 5b). c Kev tshuaj xyuas siv 18S sequencing tsis qhia txog qhov sib txawv tseem ceeb (Daim Duab Ntxiv 2).
Cov qauv SAV raws li 16S sequences tau muab piv rau Shannon richness thiab pom richness ntawm phylum level. (a) Kev tshuaj xyuas tus thawj coj tseem ceeb (PCoA) raws li tag nrho cov qauv microbial hauv cov kab mob tsis tau kho pollen-pub lossis tswj (xiav) thiab mancozeb-pub larvae (txiv kab ntxwv). Txhua qhov chaw khaws cov ntaub ntawv sawv cev rau ib qho qauv sib cais. PCoA tau suav siv Bray-Curtis nrug ntawm multivariate t faib. Ovals sawv cev rau 80% qib kev ntseeg siab. (b) Boxplot, raw Shannon wealth data (cov ntsiab lus) thiab c. Observable wealth. Boxplots qhia cov thawv rau kab nruab nrab, interquartile range (IQR), thiab 1.5 × IQR (n = 3).
Cov kab mob me me uas noj cov paj ntoos uas kho los ntawm mancozeb thiab tsis kho. (a) Muaj ntau hom kab mob me me nyob hauv cov kab mob me me. (b) Daim ntawv qhia cua sov ntawm cov kab mob me me uas tau txheeb xyuas. Delftia (qhov sib piv ntawm qhov sib txawv (OR) = 0.67, P = 0.0030) thiab Pseudomonas (OR = 0.3, P = 0.0074), Microbacterium (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060); Cov kab ntawm daim ntawv qhia cua sov tau muab sib sau ua ke siv qhov deb ntawm kev sib raug zoo thiab kev sib txuas nruab nrab.
Peb cov txiaj ntsig qhia tau tias kev noj tshuaj tua kab mob (mancozeb) thiab cov tshuaj tua kab mob hauv lub cev (pyrostrobin thiab trifloxystrobin), uas siv dav thaum lub sijhawm paj, ua rau cov kab mob pob kws tsis hnyav zuj zus thiab ua rau cov kab mob tuag ntau ntxiv. Tsis tas li ntawd xwb, mancozeb txo qhov ntau haiv neeg thiab kev nplua nuj ntawm cov kab mob me me thaum lub sijhawm npaj. Myclobutanil, lwm yam tshuaj tua kab mob hauv lub cev, ua rau cov kab mob tsis hnyav zuj zus ntawm peb koob tshuaj. Qhov cuam tshuam no tau pom tseeb ntawm lub sijhawm thib ob (hnub 5) thiab thib peb (hnub 8). Qhov sib txawv, cyprodinil thiab captan tsis txo qhov hnyav nce lossis ciaj sia piv rau pawg tswj. Raws li peb paub, txoj haujlwm no yog thawj zaug los txiav txim siab txog cov teebmeem ntawm cov kab mob sib txawv uas siv los tiv thaiv cov qoob loo pob kws los ntawm kev raug cov paj ntoos ncaj qha.
Txhua txoj kev kho mob fungicide txo qhov hnyav ntawm lub cev piv rau kev kho mob tswj. Mancozeb muaj qhov cuam tshuam loj tshaj plaws rau qhov hnyav ntawm tus kab mob nrog qhov nruab nrab txo qis ntawm 51%, ua raws li pyrithiostrobin. Txawm li cas los xij, lwm txoj kev tshawb fawb tsis tau tshaj tawm txog cov teebmeem tsis zoo ntawm cov tshuaj fungicides hauv daim teb ntawm theem kab mob44. Txawm hais tias dithiocarbamate biocides tau pom tias muaj kev lom tsawg45, ethylene bisdithiocarbamates (EBDCS) xws li mancozeb tuaj yeem lwj mus rau urea ethylene sulfide. Muab nws cov teebmeem mutagenic hauv lwm cov tsiaj, cov khoom puas tsuaj no yuav yog lub luag haujlwm rau cov teebmeem pom46,47. Cov kev tshawb fawb yav dhau los tau qhia tias kev tsim ntawm ethylene thiourea yog cuam tshuam los ntawm cov yam xws li kub siab48, av noo49 thiab ntev ntawm kev khaws cia khoom50. Cov xwm txheej khaws cia kom zoo rau biocides tuaj yeem txo cov teebmeem no. Tsis tas li ntawd, European Food Safety Authority tau qhia txog kev txhawj xeeb txog kev lom ntawm pyrithiopide, uas tau pom tias yog carcinogenic rau cov kab mob zom zaub mov ntawm lwm cov tsiaj51.
Kev noj mancozeb, pyrithiostrobin, thiab trifloxystrobin hauv qhov ncauj ua rau cov kab laug sab pob kws tuag ntau ntxiv. Qhov sib txawv, myclobutanil, ciprocycline thiab captan tsis muaj feem cuam tshuam rau kev tuag. Cov txiaj ntsig no txawv ntawm Ladurner et al.52, uas tau qhia tias captan txo qhov muaj sia nyob ntawm cov neeg laus O. lignaria thiab Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae). Tsis tas li ntawd, cov tshuaj tua kab mob xws li captan thiab boscalid tau pom tias ua rau cov kab laug sab tuag52,53,54 lossis hloov tus cwj pwm noj55. Cov kev hloov pauv no, ua rau, tuaj yeem cuam tshuam rau qhov zoo ntawm cov paj ntoos thiab thaum kawg lub zog ntawm theem kab laug sab. Kev tuag pom hauv pawg tswj hwm tau sib xws nrog lwm cov kev tshawb fawb 56,57.
Qhov piv ntawm cov txiv neej nyiam poj niam uas pom hauv peb txoj haujlwm yuav piav qhia los ntawm cov yam xws li kev sib yuav tsis txaus thiab huab cua tsis zoo thaum lub sijhawm paj, raws li tau hais ua ntej rau O. cornuta los ntawm Vicens thiab Bosch. Txawm hais tias poj niam thiab txiv neej hauv peb txoj kev tshawb fawb muaj plaub hnub los sib yuav (lub sijhawm feem ntau suav tias txaus rau kev sib yuav ua tiav), peb txhob txwm txo qhov muaj zog ntawm lub teeb kom txo qis kev ntxhov siab. Txawm li cas los xij, qhov kev hloov kho no yuav cuam tshuam rau cov txheej txheem sib yuav yam tsis tau xav txog61. Tsis tas li ntawd, muv ntsib ntau hnub ntawm huab cua tsis zoo, suav nrog nag thiab kub qis (<5°C), uas kuj tseem tuaj yeem cuam tshuam tsis zoo rau kev sib yuav ua tiav4,23.
Txawm hais tias peb txoj kev tshawb fawb tsom mus rau tag nrho cov kab mob me me hauv cov kab mob me me, peb cov txiaj ntsig muab kev nkag siab txog kev sib raug zoo ntawm cov zej zog kab mob uas yuav tseem ceeb rau kev noj zaub mov ntawm cov muv thiab kev raug tshuaj tua kab mob. Piv txwv li, cov kab mob me me uas noj paj ntoos uas kho los ntawm mancozeb tau txo qis cov qauv thiab kev muaj ntau ntawm cov kab mob me me piv rau cov kab mob me me uas noj paj ntoos uas tsis kho. Hauv cov kab mob me me uas noj paj ntoos uas tsis kho, cov pab pawg kab mob Proteobacteria thiab Actinobacteria yog cov tseem ceeb thiab feem ntau yog aerobic lossis facultatively aerobic. Cov kab mob Delft, feem ntau cuam tshuam nrog cov kab mob ib leeg, paub tias muaj cov tshuaj tua kab mob, qhia txog lub luag haujlwm tiv thaiv kab mob. Lwm hom kab mob, Pseudomonas, muaj ntau hauv cov kab mob me me uas noj paj ntoos uas tsis kho, tab sis tau txo qis ntau hauv cov kab mob me me uas kho los ntawm mancozeb. Peb cov txiaj ntsig txhawb nqa cov kev tshawb fawb yav dhau los txheeb xyuas Pseudomonas ua ib qho ntawm cov genera muaj ntau tshaj plaws hauv O. bicornis35 thiab lwm yam kab mob ib leeg34. Txawm hais tias tsis tau muaj kev tshawb nrhiav txog cov pov thawj ntawm Pseudomonas hauv kev noj qab haus huv ntawm O. cornifrons, cov kab mob no tau pom tias txhawb kev tsim cov tshuaj lom hauv cov kab Paederus fuscipes thiab txhawb kev ua haujlwm ntawm arginine hauv vitro 35, 65. Cov kev soj ntsuam no qhia txog lub luag haujlwm tseem ceeb hauv kev tiv thaiv kab mob thiab kab mob thaum lub sijhawm loj hlob ntawm O. cornifrons larvae. Microbacterium yog lwm hom kab mob uas tau txheeb xyuas hauv peb txoj kev tshawb fawb uas tau tshaj tawm tias muaj ntau tus neeg nyob hauv cov kab dub tub rog nyob rau hauv kev tshaib plab 66. Hauv O. cornifrons larvae, microbacteria yuav pab txhawb kev sib npaug thiab kev ua haujlwm ntawm cov kab mob hauv plab nyob rau hauv kev ntxhov siab. Tsis tas li ntawd, Rhodococcus pom nyob rau hauv O. cornifrons larvae thiab paub txog nws cov peev xwm tshem tawm cov tshuaj lom 67. Hom kab mob no kuj pom nyob rau hauv plab ntawm A. florea, tab sis muaj tsawg heev 68. Peb cov txiaj ntsig qhia txog qhov muaj ntau yam kev hloov pauv ntawm ntau hom kab mob uas tuaj yeem hloov pauv cov txheej txheem metabolic hauv cov kab mob. Txawm li cas los xij, kev nkag siab zoo dua txog kev ua haujlwm ntawm O. cornifrons yog qhov xav tau.
Hauv kev xaus lus, cov txiaj ntsig qhia tau tias mancozeb, pyrithiostrobin, thiab trifloxystrobin txo qhov hnyav ntawm lub cev thiab ua rau cov kab laug sab pob kws tuag ntau ntxiv. Txawm hais tias muaj kev txhawj xeeb ntau ntxiv txog cov teebmeem ntawm cov tshuaj tua kab mob rau cov kab laug sab, muaj qhov xav tau kom nkag siab zoo dua txog cov teebmeem ntawm cov metabolites seem ntawm cov tshuaj no. Cov txiaj ntsig no tuaj yeem suav nrog rau hauv cov lus pom zoo rau cov kev pab cuam tswj kab laug sab uas pab cov neeg ua liaj ua teb zam kev siv cov tshuaj tua kab mob ua ntej thiab thaum lub sijhawm paj ntoo txiv hmab txiv ntoo los ntawm kev xaiv cov tshuaj tua kab mob thiab hloov lub sijhawm ntawm kev siv, lossis los ntawm kev txhawb kom siv cov kev xaiv uas tsis muaj kev phom sij tsawg dua 36. Cov ntaub ntawv no tseem ceeb rau kev tsim cov lus pom zoo. ntawm kev siv tshuaj tua kab, xws li kev kho cov kev pab cuam tsuag uas twb muaj lawm thiab hloov lub sijhawm tsuag thaum xaiv cov tshuaj tua kab mob lossis txhawb kom siv cov kev xaiv uas tsis muaj kev phom sij tsawg dua. Xav tau kev tshawb fawb ntxiv rau cov teebmeem tsis zoo ntawm cov tshuaj tua kab mob rau qhov sib piv ntawm poj niam txiv neej, tus cwj pwm noj mov, microbiome plab, thiab cov txheej txheem molecular hauv qab cov kab laug sab pob kws poob phaus thiab tuag.
Cov ntaub ntawv qhov chaw 1, 2 thiab 3 hauv Daim Duab 1 thiab 2 tau muab tso rau hauv lub chaw khaws ntaub ntawv figshare DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 thiab https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233. Cov kab ke uas tau tshuaj xyuas hauv kev tshawb fawb tam sim no (Daim Duab 4, 5) muaj nyob rau hauv NCBI SRA chaw khaws ntaub ntawv raws li tus lej nkag PRJNA1023565.
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Lub sijhawm tshaj tawm: Tsib Hlis-14-2024